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雜交過(guò)程是高度特異性的,可以根據(jù)所使用的探針已知序列進(jìn)行特異性的靶序列檢測(cè)。
其基本原理就是應(yīng)用核酸分子的變性和復(fù)性的性質(zhì),使來(lái)源不同的DNA(或RNA)片段,按堿基互補(bǔ)關(guān)系形成雜交雙鏈分子(heteroduplex)。
雜交雙鏈可以在DNA與DNA鏈之間,也可在RNA與DNA鏈之間形成。
使雙螺旋解開(kāi)成為單鏈,因此,變性技術(shù)也是核酸雜交的一個(gè)環(huán)節(jié)。
雜交的雙方是所使用探針和要檢測(cè)的核酸。
該檢測(cè)對(duì)象可以是克隆化的基因組DNA,也可以是細(xì)胞總DNA或總RNA。
根據(jù)使用的方法被檢測(cè)的核酸可以是提純的,也可以在細(xì)胞內(nèi)雜交,即細(xì)胞原位雜交。
探針必須經(jīng)過(guò)標(biāo)記,以便示蹤和檢測(cè)。
使用最普遍的探針標(biāo)記物是同位素,但由于同位素的安全性,近年來(lái)發(fā)展了許多非同位素標(biāo)記探針的方法。
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